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梅州网  www.meizhou.cn   2017-11-21 14:12:58   来源: sina.com.cn
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主持人:大家好,这里是山西省农村科技函授大学《农村视频微课堂》。今天请来了省农科院食用菌研究所王华教授。王教授这期给我们讲讲蜜环菌菌种该如何制作。

王教授:蜜环菌菌种宜选用经过分离纯化,人工培育的栽培种,或者新培育的菌枝,以利于培育出生活力强的优质蜜环菌材。菌种制作分为三个阶段,分别是母种、原种、栽培种。

1、母种的分离和培养

培养基制作

配比A:马铃薯200克,葡萄糖20克,磷酸二氢钾1.5克,硫酸镁1克,酵母膏2克,琼脂18克,清水1000毫升,pH值5.4-5.8。

配比B:马铃薯200克,葡萄糖20克,磷酸二氢钾1克,硫酸镁1克,麦芽发酵液100毫升,清水1000毫升,pH值5.4-5.8。

按常规制作,用试管或三角瓶都可以。

母种的分离和培养

母种的分离材料一般是从子实体、菌索、菌材和菌土中进行分离。具体方法是:把菌体冲洗干净,切成小段(小块),用75%的酒精溶液清洗消毒两次,转移到0.1%的汞溶液中浸泡5-10分钟,然后移到无菌水中,在无菌条件下把种源体小块接到培养基上,在25℃下进行培养。如果用子实体分离,只需用75%的酒精擦拭表面后,将菌盖和菌柄对半分开,从菌盖和菌柄连接处挑取小块菌肉接到培养基上,进行培养。新分离的菌种有菌丝和菌索两种。菌丝体呈白色绒毛状,需要经过较长的时间才能形成菌索,菌索生长较快,20-30天就可长满试管。新生菌索为白色,随后呈红棕色,后期变为黑棕色。菌索生长的同时也生长菌丝,菌丝萌发后向周围扩大成圆形,中心逐渐变为褐色,又伸展成分叉状菌索,长满后即作母种待用。在分离过程中,杂菌严重抑制蜜环菌的生长,因此,为了防止杂菌污染,可在培养基中加适量抗生素,如加青霉素(20μg/mL),可抑制革兰氏反应阳性细菌的生长,加金霉素(30μg/mL)和氯霉素(50μg/mL),可抑制大部分细菌的生长。其中只有氯霉素可以在灭菌前加入和培养基一起高压灭菌,其他几种抗生素都是在培养基灭菌后并冷却到45℃左右时才可加入。

2、原种的制作和培养

原种培养基:木屑75%,麦麸22%,硫酸钙1.5%,白糖1.5%,清水适量,pH值自然。拌料、装种、灭菌和一般食用菌制种相同。用试管母种接种后,培养出来的种,一般称作原种,原种可作为栽培种的繁殖种。。

3、蜜环菌小菌枝栽培种

可在有资质的菌种生产厂家购买,也可自制栽培种。采用果树细枝条短截成2-3cm装入菌种瓶,加水至淹没枝条,封口后常规高压灭菌,然后接入活化的蜜环菌菌种,栽培种可用试管种接种,也可用栽培种直接来繁殖,前者慢,后者快,待菌索长满瓶后备用。培养的温度保持在24℃-25℃,一般在40-60天则可长满培养料。蜜环菌也要选取新鲜的、生命力旺盛的蜜环菌,应达到如下要求:

菌丝生长旺盛、粗壮均匀有力,菌丝紧贴每根小菌枝,长满后整个瓶(袋)内形成一个菌丝、菌枝团。

菌瓶(袋)营养液呈透明的棕红色、无浑浊,瓶壁上有白色至浅黄色透明半固体菌丝分泌物,黑暗中有青白色荧光,瓶口无杂菌,有少量棕红色至浅黑色菌丝长出。

用手捏菌袋或菌瓶有硬度,无霉味(变软或有其它气味属被污染菌种)。

作者:变软或有其它气味属被污染菌种

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